蜂產品檢驗技術――生物監測技術
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隨著生活水平的不斷提高和蜂產品深加工的迅速發展，人們對蜂產品質量和食品安全性的要求也越來越高。利用傳統的理化檢驗方法已經難以滿足日益嚴峻的蜂產品質量檢測的需求，人們需要靈敏度更高、特異性更強、更簡便快捷的檢測方法。伴隨生物技術發展起來的生物檢測方法使這一要求即將成為現實。生物檢測的產生得益于現代生物技術的迅速發展。由于蜂產品原料主要來源于植物，利于某些生物材料（如酶、抗體、組織、細胞等）對一定的化學物質具有特異性識別能力或靈敏響應能力，檢測蜂產品質量和污染物的生物檢測技術，必將是未來蜂產品分析檢測研究的熱點之一。由于具有特異的生物識別功能，選擇性高，結果精確、靈敏、專一，微量和快速等優點，生物檢測目前在我國食品檢驗中顯示出巨大的應用潛力，必將逐漸應用到包括蜂產品在內的各個領域，包括蜂產品原料的檢驗、品質評價、質量監督、生產過程的質量監控等方面。 1、 生物檢測技術的應用 1.1 生物酶技術 酶檢測法特異性強，可用來測定蜂產品原料中農制劑殘留含量、微生物污染等，是比較常用的生物檢測方法。其中，酶學與免疫學方法結合起來的酶聯免疫分析（ELISA）檢測技術，由于其選擇性好，靈敏度高，已經在食品及蜂產品檢驗等各個領域得到廣泛應用。 ELISA最大的優點是準確靈敏，因此世界糧農組織（FAO）已向許多國家推薦此技術，美國化學會將此列為農制劑殘留的支柱技術之一。國內在這方面開展得相對較晚，但也取得了一些進展。蔣世偉等人利用競爭性酶聯免疫檢測法，并用乙酸乙脂萃取，增加靈敏度和特異性，篩查蜂蜜等各種基質中存在的氯霉素，檢測下線可達到0.02mg/g。科技人員還通過不斷的探討，以進一步完善生物酶技術。通過與23個實驗室的不同方法進行比較，發現這種方法更可靠、更敏感，價格也更便宜。 1.2 PCR技術 PCR即聚合酶鏈式反應，是一種在體外快速擴增特定基因或DNA序列的方法，又稱為基因的體外擴增法。PCR技術最早應用于基因克隆和轉基因檢測，由于其精確、微量等特點，現已廣泛應用到其他領域。隨著對蜂產品微生物遺傳性質了解的逐漸深入，許多致病菌的遺傳背景進一步明了，這一技術在蜂產品檢測中將逐漸顯示出其應用前景。其原理是利用對某些微生物特異基因的擴增，確定蜂產品是否受到這些微生物的污染。 利用PCR方法對病原菌進行檢測早在1992年就有報道，然而利用這一技術檢測蜂產品病原微生物則是近兩年才逐漸應用。但是PCR技術在實際應用中也表現出一些缺陷，例如在有死細菌存在的情況下容易產生假陽性、不能檢測致毒微生物的毒性等。人們現已認識到這一點，并試圖將PCR技術與其他方法相結合，以找到更有效的檢測方法。不過相信隨著生物技術的飛速發展，以及如何利用PCR技術鑒別致毒微生物產生的毒素等方面的深入研究，必將為PCR技術在蜂產品檢測領域更加廣泛的應用提供新的思路。 1.3 生物傳感器 生物傳感器選用選擇性良好的生物材料（如酶、DNA、抗原等）作為分子識別元件，當待測物與分子識別元件特異性相結合后，所產生的復合物（如光、熱等）通過信號轉換器變為可以輸出的電信號、光信號等并予以放大輸出，從而得到相應的檢測結果。生物傳感器由于具有良好的敏感性、特異性、操作簡便、反應速度快等優勢，目前正挑戰傳統檢測方法的主體地位。
蜂產品行業工作者一直渴求一套快速、可靠、簡便的檢測系統，用生物傳感器來檢測可滿足這些要求。生物傳感器可大大縮短檢測時間，如對沙門氏菌的檢測可縮短到24h以內。而且儀器體積小，攜帶方便，很適合現場檢測使用。 盡管現在生物傳感器的應用受到穩定性、重現性和使用壽命的限制，再加上蜂產品含有多且含量差異大等問題，使得在蜂產品檢測中實現商業化的生物傳感器數量受到制約。但隨著計算機技術和生物材料的不斷發展，生物傳感器技術在蜂產品深加工領域的應用將會越來越廣泛。 1.4 生物芯片 隨著經濟全球化的發展，蜂產品衛生檢驗已成為WTO貿易技術壁壘。蜂產品經營過程中，尤其是蜂產品出口貿易需要高質量、高通量的檢測與監控體系。生物芯片技術是檢驗、檢疫中最快速、大通量、最適用的高新技術。生物芯片技術可以對蜂產品安全狀態有一個快速的、科學的、量化的了解；建立出口蜂產品監督管理的預警和快速反應系統。不過由于目前費用較昂貴，加上生物芯片應用性能目前還未達到人們所希望的程度，極大的限制了其在蜂產品檢測中的應用。但鑒于生物芯片所顯示出的巨大潛力和誘人的商業前景，目前世界上許多國家和地區已經相繼開展了生物芯片的研制和開發工作。
2、在蜂產品檢測中的具體應用 2.1 有害微生物的檢測 蜂產品中有害微生物對人類健康會造成巨大傷害；對蜂產品的品質和儲藏也會造成毀滅性打擊。因此，快速有效的檢測方法是控制有害微生物傳播的有效途徑。生物檢測技術在這一領域已經取得了一定成果。相關生物檢測技術在國內外都相繼有成功檢測出有害微生物的報道，到目前為止，利用PCR技術、酶聯免疫技術、生物傳感器等方法都已成功地應用到蜂產品有害微生物的檢驗中了。 2.2 蜂產品中農制劑殘留的檢測
蜂產品中農制劑殘留問題早已引起了各進出口國家的關注。因此，農制劑殘留的分析方法和檢驗技術也受到了高度重視。目前，應用于農制劑殘留檢驗的主要生物檢驗方法是酶技術和生物傳感器。早在1989年，就有報道有一種電流式生物傳感器用于測定有機磷殺蟲劑，使用的是人造酶；隨后在1991年美國生產出了ELISA 為基礎建立起來的檢測箱，檢測限都在10-9的數量限。 2.3 含有和品質的檢測 生物傳感器是最早應用于食品含有和品質檢測的生物檢測方法，再應用于蜂產品檢測，且應用得較為廣泛。而最早的生物傳感器是葡萄糖傳感器，主要用于檢測食品中糖的含量。1991年，開發了在多種食品原料中測谷氨酸的介體酶傳感器，其線性范圍0.2-2mmol/L。后來又生產出多種生物敏感材料的生物傳感器；近年又生產以某種氣味結合蛋白為敏感材料，制成氣味生物傳感器，用于檢測一些香味物質。
3、展望 當今的蜂產品檢驗逐漸趨向于簡便、快捷、靈敏和微量化。生物檢測以其自身獨特優勢在蜂產品檢驗領域方興未艾，并顯示出巨大的應用前景。而生物技術發展的日新月異，必將對生物檢測方法不斷補充和完善，相信生物檢測在蜂產品檢驗中將會發揮越來越重要的作用。
作者：陳明勝 來源：中國蜂產品報
蜂產品行業工作者一直渴求一套快速、可靠、簡便的檢測系統，用生物傳感器來檢測可滿足這些要求。生物傳感器可大大縮短檢測時間，如對沙門氏菌的檢測可縮短到24h以內。而且儀器體積小，攜帶方便，很適合現場檢測使用。 盡管現在生物傳感器的應用受到穩定性、重現性和使用壽命的限制，再加上蜂產品含有多且含量差異大等問題，使得在蜂產品檢測中實現商業化的生物傳感器數量受到制約。但隨著計算機技術和生物材料的不斷發展，生物傳感器技術在蜂產品深加工領域的應用將會越來越廣泛。 1.4 生物芯片 隨著經濟全球化的發展，蜂產品衛生檢驗已成為WTO貿易技術壁壘。蜂產品經營過程中，尤其是蜂產品出口貿易需要高質量、高通量的檢測與監控體系。生物芯片技術是檢驗、檢疫中最快速、大通量、最適用的高新技術。生物芯片技術可以對蜂產品安全狀態有一個快速的、科學的、量化的了解；建立出口蜂產品監督管理的預警和快速反應系統。不過由于目前費用較昂貴，加上生物芯片應用性能目前還未達到人們所希望的程度，極大的限制了其在蜂產品檢測中的應用。但鑒于生物芯片所顯示出的巨大潛力和誘人的商業前景，目前世界上許多國家和地區已經相繼開展了生物芯片的研制和開發工作。
2、在蜂產品檢測中的具體應用 2.1 有害微生物的檢測 蜂產品中有害微生物對人類健康會造成巨大傷害；對蜂產品的品質和儲藏也會造成毀滅性打擊。因此，快速有效的檢測方法是控制有害微生物傳播的有效途徑。生物檢測技術在這一領域已經取得了一定成果。相關生物檢測技術在國內外都相繼有成功檢測出有害微生物的報道，到目前為止，利用PCR技術、酶聯免疫技術、生物傳感器等方法都已成功地應用到蜂產品有害微生物的檢驗中了。 2.2 蜂產品中農制劑殘留的檢測
蜂產品中農制劑殘留問題早已引起了各進出口國家的關注。因此，農制劑殘留的分析方法和檢驗技術也受到了高度重視。目前，應用于農制劑殘留檢驗的主要生物檢驗方法是酶技術和生物傳感器。早在1989年，就有報道有一種電流式生物傳感器用于測定有機磷殺蟲劑，使用的是人造酶；隨后在1991年美國生產出了ELISA 為基礎建立起來的檢測箱，檢測限都在10-9的數量限。 2.3 含有和品質的檢測 生物傳感器是最早應用于食品含有和品質檢測的生物檢測方法，再應用于蜂產品檢測，且應用得較為廣泛。而最早的生物傳感器是葡萄糖傳感器，主要用于檢測食品中糖的含量。1991年，開發了在多種食品原料中測谷氨酸的介體酶傳感器，其線性范圍0.2-2mmol/L。后來又生產出多種生物敏感材料的生物傳感器；近年又生產以某種氣味結合蛋白為敏感材料，制成氣味生物傳感器，用于檢測一些香味物質。
3、展望 當今的蜂產品檢驗逐漸趨向于簡便、快捷、靈敏和微量化。生物檢測以其自身獨特優勢在蜂產品檢驗領域方興未艾，并顯示出巨大的應用前景。而生物技術發展的日新月異，必將對生物檢測方法不斷補充和完善，相信生物檢測在蜂產品檢驗中將會發揮越來越重要的作用。
作者：陳明勝 來源：中國蜂產品報